1. Khi xác định nội độc tố trong máu cần chú ý đến việc lựa chọn phương pháp và thuốc thử.

2. Chuẩn bị huyết tương hoặc huyết thanh

Là một mẫu lâm sàng phổ biến, huyết tương là mẫu chính và tỷ lệ sử dụng của nó là hơn 95%. Do đó, điều rất quan trọng là chuẩn bị huyết tương là phần chính của chất lỏng cơ thể. Theo Das, nội độc tố thường được gắn vào tiểu cầu ngoài trạng thái tự do, vì vậy sẽ thích hợp hơn khi sử dụng huyết tương chứa một số lượng lớn tiểu cầu làm mẫu. Hiện nay, khi điều chế huyết tương người hoặc huyết tương động vật, để ngăn ngừa tổn thương tế bào, các quốc gia nước ngoài chủ yếu sử dụng phương pháp tách nhiệt độ thấp, sử dụng các mẫu huyết tương chứa một số lượng lớn tiểu cầu, tức là ở điều kiện tách 4 ℃ 1000gx10 phút, hoặc 3000gx40 điều kiện tách giây khi không có máy ly tâm nhiệt độ thấp. Không được phép tiến hành phân tách tốc độ cao và lâu dài ở nhiệt độ bình thường. Ngoài ra, khi tách huyết tương hoặc huyết thanh, cần tránh nhiễm vi khuẩn.

Chuẩn bị huyết thanh: sử dụng ống tiêm không có chất chống đông để lấy máu và chuyển vào ống ly tâm, đặt vào chậu nước đá trong 30 phút, ở 4 ℃, 1000xg, ly tâm 10 phút.

Sau khi tách huyết tương hoặc huyết thanh nếu tạm thời chưa sử dụng có thể trữ đông ở nhiệt độ - 80℃ và sử dụng trong vòng 1 tháng. Lưu ý Để tránh hấp thụ nội độc tố, vui lòng sử dụng ống nghiệm thủy tinh để bảo quản.

3. Các loại và tác dụng của thuốc chống đông máu

Trong quá trình điều chế huyết tương, do có bổ sung một số chất chống đông nên loại và lượng chất chống đông có ảnh hưởng lớn đến tốc độ hồi phục. Nói chung, các chất chống đông máu thường được sử dụng chủ yếu bao gồm heparin, natri citrate và EDTA, trong đó heparin được sử dụng rộng rãi nhất. Tuy nhiên, chúng tôi biết rằng một lượng lớn heparin sẽ cản trở phản ứng nội độc tố, đặc biệt đối với phương pháp gia nhiệt pha loãng và phương pháp chiết xuất chloroform, sẽ làm giảm tốc độ thu hồi, nhưng ít ảnh hưởng đến phương pháp PCA, vì vậy lượng heparin được thêm vào và được giải phóng trong quá trình điều chế huyết tương chỉ cần 2~5 μL/ml là đủ.