Nói chung, do thành phần phức tạp của máu, nhiều chất, đặc biệt là huyết tương hoặc huyết thanh của động vật bậc cao, có tác dụng cản trở mạnh phản ứng giữa thuốc thử TAL (LAL) và nội độc tố. Do đó, khi chúng tôi kiểm tra nội độc tố của các mẫu như vậy, chúng tôi phải loại bỏ các chất cản trở trước khi kiểm tra.

Hiện tại, các chất can thiệp trong huyết tương chủ yếu bao gồm các chất ức chế protease khác nhau, protein liên kết nội độc tố và chất ức chế plasminogen. Đối với phép đo màu, yếu tố Xa có thể phân hủy chuỗi peptide Boc-LEU-Gly-Arg-PNA. Vì vậy, cần phải loại bỏ các chất cản trở này trước khi xác định.

Các phương pháp tiền xử lý để loại bỏ các chất cản trở trong máu như sau:

(1) Phương pháp gia nhiệt pha loãng: plasma được pha loãng 3~10 lần với nước hòa tan, sau đó được gia nhiệt trong nước 37~100 ℃. Thời gian giữ thường là 5 ~ 10 phút;

(2) Phương pháp chiết xuất chloroform: thêm cùng một lượng chloroform vào huyết tương và rung trong 3 giờ, sau đó lấy lớp trên để phát hiện;

(3) Phương pháp xử lý ether: thêm ether vào huyết tương để xử lý và loại bỏ ether ở 40 ℃;

(4) Phương pháp axit trifluoroacetic: thêm axit axetic vào huyết tương để điều chỉnh pH 4,0, sau đó sử dụng K2HPO4 để điều chỉnh pH về 7 ~ 7,5;

(5) Phương pháp xử lý chất hoạt động bề mặt: giống như phương pháp gia nhiệt pha loãng, chỉ có nước pha loãng được chuyển thành chất hoạt động bề mặt;

(6) Lọc gel;

(7) Phương pháp xử lý bằng kiềm: huyết tương được giữ ở 0,2NNaOH 37 ℃ trong 10 phút rồi trung hòa bằng HCl;

(số 8) phương pháp axit perchloric (PCA) hoặc phương pháp axit perchloric mới (New PCA);

(9) Phương pháp hạt: đưa nhựa đặc biệt hấp thụ nội độc tố vào plasma, lấy nó ra và thêm thuốc thử LAL để phản ứng.

Trong số các phương pháp này, các phương pháp thường được sử dụng là phương pháp chiết xuất chloroform, phương pháp gia nhiệt pha loãng, phương pháp axit perchloric (PCA) và phương pháp axit perchloric mới (PCA mới). Hai phương pháp đầu tiên cần được thảo luận trong quá trình xác định do tồn tại tốc độ phục hồi nội độc tố, dương tính giả và các vấn đề khác. Phương pháp PCA (Phương pháp PCA mới), do tỷ lệ thu hồi nội độc tố được thêm vào tốt, hiện chủ yếu được sử dụng trong điều trị tiền lâm sàng ở Nhật Bản.