Tin tức

Trang chủ / Tin tức / Các bước nuôi cấy tế bào và biện pháp phòng ngừa!

Các bước nuôi cấy tế bào và biện pháp phòng ngừa!

Gửi bởi Quản trị viên | 09 Jan

r nền kinh tế

1. Lấy ống đã đông lạnh ra khỏi nitơ lỏng và ngay lập tức cho vào bể nước 37℃, lắc nhẹ. Sau khi chất lỏng tan chảy (khoảng 1-1,5 phút), lấy ra một ít cồn và đặt nó lên bàn làm việc siêu sạch.

2. Lấy hỗn dịch tế bào cho vào ống ly tâm 15ml với 10ml môi trường (rửa ống đã đông bằng môi trường và rửa hết tế bào dính vào thành ống) ly tâm ở 1000 trong 5 phút.

3. Dịch nổi phía trên được đảo ngược và 1ml môi trường được thêm vào để tạo huyền phù tế bào. Hút vào đĩa 10cm với 10 ml môi trường và lắc nhẹ trái phải để các tế bào phân bố đều trong đĩa.

4. Đánh dấu loại tế bào và ngày, tên người, v.v., đặt nó vào tủ ấm CO2, dán các tế bào và thay đổi môi trường.

5. Phương tiện được thay đổi 3 ngày một lần.

P hành hung

1. Cây được chăm sóc để đạt độ che phủ 80-90%.

2. Abup phương tiện ban đầu .

3. Thêm trypsin thích hợp (chỉ phủ tế bào) và tiêu hóa trong 1-2 phút .

4. Quá trình phân hủy được kết thúc bằng cách thêm một thể tích tương đương của môi trường chứa huyết thanh .

5. Thổi các tế bào bằng súng pipet và để tất cả chúng lơ lửng.

6. Các tế bào được hút vào ống ly tâm 15ml và ly tâm ở 1000 trong 5 phút.

7. Đổ dịch nổi và thêm 1-2ml môi trường để thổi phồng tất cả các tế bào.

8. Các tế bào được chuyển đến một số đĩa nuôi cấy tùy thuộc vào loài tế bào. Thông thường, các tế bào ung thư được chia thành 5 tế bào và 3 tế bào bình thường được truyền đi. Tiếp tục tu luyện.

Miễn phí để tiêu hóa các tế bào và ly tâm chúng (ibid. ở trên).

Treo các tế bào bằng dung dịch bảo quản đông lạnh phù hợp, chia chúng vào một ống cấp đông đã khử trùng, để yên trong vài phút và chỉ định loại tế bào và ngày bảo quản đông lạnh.4℃ 30 phút, -20℃ 30 phút, -80℃ qua đêm, và sau đó được lưu trữ trong truyền dịch nitơ lỏng.

Pha chế dung dịch bảo quản lạnh: 70% medium 20% FBS 10% DMSO. DMSO nên được thêm từ từ và lắc đều.

\

Contact Us

*We respect your confidentiality and all information are protected.